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吐毒素-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的制備方法有哪些

2025-05-08 [12]

吐毒素-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物的制備方法主要有以下幾種:

化學(xué)交聯(lián)法

  • 活潑酯法:將吐毒素(DON)與載體蛋白雞卵清白蛋白(OVA)分別溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,然后通過化學(xué)交聯(lián)技術(shù)將它們連接起來。這種交聯(lián)過程需要精確控制反應(yīng)條件,如溫度、pH值和反應(yīng)時間等。

  • 碳二亞胺法:利用碳二亞胺類試劑作為交聯(lián)劑,在一定的反應(yīng)條件下,使吐毒素和雞卵清白蛋白發(fā)生交聯(lián)反應(yīng),形成偶聯(lián)物。

納米乳包裹法

  • 納米乳的制備:稱取適量的油相(如角鯊烯和司盤85)混合均勻,再稱取吐溫80溶解于注射用水中,渦旋下加入油相中得到初乳,然后進(jìn)行高壓均質(zhì)處理,定容后得到納米乳。

  • 抗原的包載:取制備好的納米乳與吐毒素-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物混勻,在一定溫度下?lián)u床孵育一段時間,使偶聯(lián)物被包載于納米乳中。

  • 修飾與優(yōu)化:為了提高納米乳的穩(wěn)定性和生物利用度,還可以在納米乳表面包裹一層生物黏附性材料,如殼聚糖等。

其他方法

  • 基因工程法:通過基因工程技術(shù),將吐毒素的基因與雞卵清白蛋白的基因進(jìn)行融合表達(dá),從而得到吐毒素-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物。

  • 自組裝法:利用吐毒素和雞卵清白蛋白的自組裝特性,在一定的條件下,使它們自發(fā)地形成偶聯(lián)物。

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