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FITC-刀豆球蛋白A|FITC-ConA的介紹

2024-11-20 [219]

FITC-ConA|FITC-刀豆球蛋白A

FITC-刀豆球蛋白A,全稱Fluorescein-labeled Concanavalin A(簡稱FITC-Con A),是一種重要的生物標記試劑。以下是對其的詳細介紹:

一、組成與結(jié)構(gòu)

FITC-刀豆球蛋白A是將熒光染料熒光素異硫氰酸酯(FITC)與刀豆球蛋白AConcanavalin A,Con A)結(jié)合的化合物。Con A是一種源自刀豆(Canavalia ensiformis)的植物凝集素,具有四聚體結(jié)構(gòu),在pH 7.0以上時以四聚體形式存在,而在更低的pH條件下則以二聚體形式存在。它的結(jié)合活性在一定pH范圍內(nèi)相對穩(wěn)定,這為其在不同實驗條件下的使用提供了靈活性。

二、特性

1.熒光性能:FITC是一種綠色熒光染料,具有490495nm的激發(fā)波長和515520nm的發(fā)射波長。當FITCCon A結(jié)合后,形成的FITC-Con A復(fù)合物既保留了Con A的特異性結(jié)合能力,又具備了FITC的熒光標記特性。這使得FITC-Con A在紫外光或特定波長的光激發(fā)下能夠發(fā)出綠色熒光,便于在熒光顯微鏡和流式細胞儀中檢測。

2.水溶性:FITC具有較好的水溶性,這使得標記的Con A可以在生理條件下溶解并與靶標分子結(jié)合。

3.特異性結(jié)合性:Con A能夠特異性地與葡萄糖和甘露糖殘基結(jié)合,因此FITC-Con A也保留了這一特性。這種特性使它成為研究細胞膜糖結(jié)構(gòu)和糖蛋白分布的重要工具。

三、應(yīng)用

細胞成像與定位:由于FITC-Con A具有顯著的綠色熒光信號,因此可以用于細胞成像和定位。通過與細胞表面糖鏈的結(jié)合,可以觀察細胞表面的糖基分布和變化。

細胞膜糖結(jié)構(gòu)研究:FITC-Con A的特異性結(jié)合能力使其成為研究細胞膜糖結(jié)構(gòu)的有力工具。通過檢測FITC-Con A與細胞膜的結(jié)合情況,可以推斷出細胞膜上糖基的種類和數(shù)量。

糖蛋白分布分析:FITC-Con A還可以用于糖蛋白分布的分析。通過與含有α-D-葡萄糖或α-D-甘露糖殘基的糖蛋白結(jié)合,可以觀察糖蛋白在細胞或組織中的分布情況。

四、保存與注意事項

純度:通常,FITC-刀豆球蛋白A的純度要求達到95%以上。

保存方式:應(yīng)在-20℃以下干燥、避光保存,避免頻繁解凍和冷凍。

使用注意事項:在使用過程中,應(yīng)注意避免與強酸、強堿等化學物質(zhì)接觸,以免影響其熒光性能和結(jié)合能力。

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